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日本信州大學開發活體肌肉免維護培養系統,可用于微型機器人驅動!

日期:2021-11-01
提到機器人,我們腦海中浮現的通常是金屬、塑料材質的機器人。
據類生命系統(Cyborg and Bionic Systems)期刊報道,現在,除了金屬和塑料,機器人也可以擁有活體細胞和組織!
日本信州大學開發活體肌肉免維護培養系統,可用于微型機器人驅動!

這種機器人叫做生物混合機器人,利用哺乳動物的肌肉細胞作為執行器驅動,與最先進的人工執行器相比,天然的肌肉細胞具有很多優勢,例如其高能量轉換效率、無需電力或化石燃料能源供應、柔軟和靈活,還能夠自我修復!


(正在工作的機械手指,注意上方正在收縮和伸張的肌肉)
既然天然的肌肉細胞具有這么多優點,那該如何生產,或者說培養它們呢?

這就不得不提到一個關鍵技術——肌肉組織工程(TEM)。肌肉組織工程(TEM)是指利用生物活性物質,通過體外培養或構建生物細胞的方法,再造肌肉及組織的技術。

肌肉細胞中,骨骼肌細胞可以通過電刺激精確控制收縮狀態和力量,是機械馬達和執行器最通用的替代品。骨骼肌細胞的培養從未成熟的成肌細胞開始增值、分化、融合成肌管,成熟為肌纖維,再由大量的肌纖維組成骨骼肌細胞,這個培養過程需要1-3周的時間,還要每隔1-2天換一次培養基,這種方式不僅人工成本高,培養時間也很長。
最近,日本信州大學開發了一種TEM日常免維護培養系統,能夠很好地解決骨骼肌細胞培養成本高,時間久的問題,該系統具有自動更換培養基的功能,還配備電刺激設施!
▍TEMs的開發制作
這個TEM日常免維護培養系統是通過在膠原凝膠中培養小鼠成肌細胞 C2C12 細胞制作的,由六個凝膠培養模具、一個培養基更換單元和一個電刺激單元組成。
TEMs的培養過程如下:
將細胞-凝膠混合物倒入凝膠培養模具的凹槽中,先在37°C 、5% CO2的環境中培養 1.5 小時,然后用生長培養基 (GM) 覆蓋細胞-凝膠混合物,將 TEM 培養 3 天,將中間的模具取出,GM 被融合培養基 (FM) 取代,開始電刺激并持續 10 天,刺激期間每天更換FM。
TEM細胞在生長培養基中培養用于增殖,在融合培養基中培養用于分化。系統具有6個凝膠培養模具單元,每個單元可以生產兩個 TEM,因此可以同時培養12 個TEM,每個凝膠培養模具都是由聚四氟乙烯(PTFE)制造的。

再來說說電刺激培養功能。系統具備自動電刺激功能,由電刺激單元對凝膠培養模具中的 TEM 施加電刺激,將 ±4 V 和 4 ms 寬度的雙極脈沖應用于 TEM,以盡可能地抑制電解,雙極脈沖是由數據采集 (DAQ) 設備產生的。

▍收縮力測量系統
TEM 的收縮是由場電刺激引起的,為了測量TEM的收縮力,研究人員還開發了微力測量系統,先在沒有電刺激的情況下培養TEM,通過測量收縮力和收縮距離來確認 TEM 的收縮能力。然后對 TEMs 施加各種電刺激,并根據獲得的收縮力探索最合適的刺激條件。
該系統由力傳感器、放大器、溫度控制單元、顯微鏡、3 軸手動平臺和數據采集設備組成。
傳感器的輸出通過 DAQ 設備與電刺激信號同時記錄到 PC;通過將已知重量的彎曲細金屬線鉤在傳感器上,使用重力校準傳感器。在測量過程中,將 TEM 放置在緩沖鹽水的測量室中,溫度由溫控單元控制。
下圖可以看出,TEM第二次電刺激的收縮力恒定在第一次刺激的 80% 左右;隨著刺激的重復,收縮力逐漸從第一次的 85% 下降到 75%,這說明,盡管每一次電刺激都是短期刺激,但反復電刺激會降低 TEM 的收縮力。
除此之外,TEM的收縮力在電脈沖為1 Hz 時顯著增加,而在4 Hz 時急劇下降,這說明適當施加數量的電脈沖會增強 TEM 的收縮力,而過多施加電脈沖會降低收縮力。
▍總結與展望
該研究發表在英文科技期刊Cyborg and Bionic Systems(類生命系統)中,該期刊由北京理工大學(BIT)和美國科學促進會(AAAS)/Science共同打造。

TEM肌肉能使原本沒有活力的機械部分完成諸如抓握和行走等動作,從而打造出十分靈活的“賽博格”,相比傳統機器人,他們對使用者和環境更加安全。
我們今天介紹的這款TEM培養系統,所生產的TEM肌肉的強度足以用于微型機器人,然而電刺激的方式會在一定程度上對TEM肌肉造成損壞,導致使用壽命不長,研究人員將會考慮使用其他刺激改善 TEM的生產,例如熱刺激或機械刺激。
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