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國(guó)內(nèi)首款CRISPR技術(shù)新冠試劑獲批!

日期:2020-12-02

國(guó)內(nèi)首款CRISPR技術(shù)新冠試劑獲批!

鎖炎

據(jù)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局公布的消息：2020年12月01日醫(yī)療器械批準(zhǔn)證明文件（準(zhǔn)產(chǎn)）待領(lǐng)取信息發(fā)布-1，由杭州眾測(cè)生物科技有限公司研發(fā)的新型冠狀病毒2019-nCov核酸檢測(cè)試劑盒(CRISPR免疫層析法)?獲批了！

而在5月7日，Sherlock Biosciences公司就曾宣布，其開(kāi)發(fā)的新冠病毒CRISPR檢測(cè)試劑盒已獲得美國(guó)FDA授予的緊急使用授權(quán)（EUA）。新聞稿指出，這是美國(guó)FDA首次授權(quán)使用基于CRISPR技術(shù)的新冠病毒檢測(cè)。
此次藥監(jiān)局批準(zhǔn)杭州眾測(cè)研發(fā)的新型冠狀病毒2019-nCov核酸檢測(cè)試劑盒(CRISPR免疫層析法)，是國(guó)內(nèi)首次批準(zhǔn)基于CRISPR技術(shù)的新冠病毒檢測(cè)。
從已公開(kāi)的信息來(lái)看，此次獲批的方法學(xué)為CRISPR免疫層析法，而杭州眾測(cè)公司一直致力于其核心技術(shù)-RAA（重組酶介導(dǎo)鏈替換核酸擴(kuò)增)的研發(fā)。由此可見(jiàn)該產(chǎn)品或采用RAA技術(shù)擴(kuò)增之后，再使用CRISPR酶進(jìn)行檢測(cè)。
重組酶介導(dǎo)鏈替換核酸擴(kuò)增技術(shù)（RAA技術(shù)），是一種在恒溫核酸快速擴(kuò)增技術(shù)，利用從細(xì)菌或真菌中獲得的重組酶，在常溫下，該重組酶可與引物DNA緊密結(jié)合，形成酶和引物的聚合體，當(dāng)引物在模板DNA上搜索到與之完全匹配的互補(bǔ)序列時(shí)，在單鏈DNA結(jié)合蛋白的幫助下，打開(kāi)模板 DNA的雙鏈結(jié)構(gòu)，并在DNA聚合酶的作用下，形成新的DNA互補(bǔ)鏈，擴(kuò)增產(chǎn)物以指數(shù)級(jí)增長(zhǎng)。利用熒光探針的標(biāo)記，可以實(shí)現(xiàn)定時(shí)定量的結(jié)果分析，通常 5-15min就可以得到熒光檢測(cè)結(jié)果。
目前市面上常見(jiàn)的恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)有十幾種之多，但對(duì)于變溫PCR并未構(gòu)成明顯的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)，而CRISPR技術(shù)的出現(xiàn)，讓恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)又有了新的發(fā)展方向，恒溫?cái)U(kuò)增能夠降低設(shè)備門(mén)檻，CRISPR技術(shù)能夠提高檢測(cè)的敏感度，兩者搭配之后，未來(lái)充滿著想象。

張鋒等研究組最近開(kāi)發(fā)了一個(gè)名為SHERLOCK（特定高靈敏度酶解報(bào)告系統(tǒng)）的平臺(tái)，將等溫預(yù)擴(kuò)增與Cas13組合起

來(lái)檢測(cè)單個(gè)RNA或DNA分子。

張鋒等研究組在此報(bào)告將SHERLOCKv2整合到四個(gè)方面：1）使用正交CRISPR酶的4通道單反應(yīng)復(fù)合;?2）定量測(cè)量輸入降至2 aM;3）通過(guò)將Cas13與輔助性CRISPR相關(guān)酶Csm6組合，使信號(hào)靈敏度提高3.5倍;?4）橫向流動(dòng)讀出。?SHERLOCKv2可通過(guò)側(cè)流檢測(cè)登革病毒或寨卡病毒ssRNA以及患者液體活檢樣本中的突變，突出其作為核酸的多路復(fù)用，便攜式，快速和定量檢測(cè)平臺(tái)的潛力。

Doudna等研究組發(fā)現(xiàn)目標(biāo)激活的非特異性ssDNase切割也是其他V型CRISPR-Cas12酶的特性。通過(guò)將Cas12a ssDNase激活與等溫?cái)U(kuò)增相結(jié)合，Doudna等研究組創(chuàng)建了一種名為DNA Endonuclease Targeted CRISPR Trans Reporter（DETECTR）的方法，該方法實(shí)現(xiàn)了DNA檢測(cè)的超高的靈敏度。?

時(shí)至今日，圍繞CRISPR專(zhuān)利的問(wèn)題仍存在諸多紛爭(zhēng)，即使是核心專(zhuān)利也存在爭(zhēng)議，況且已在核心專(zhuān)利基礎(chǔ)上延伸出了上千個(gè)應(yīng)用專(zhuān)利，面對(duì)上千個(gè)CRISPR專(zhuān)利，任何一個(gè)單位或企業(yè)都難以獲得所有專(zhuān)利的授權(quán)。因此國(guó)內(nèi)正在進(jìn)行CRISPR技術(shù)的開(kāi)發(fā)的企業(yè)，如何進(jìn)行應(yīng)用專(zhuān)利的保護(hù)是未來(lái)很重要的一個(gè)考題。
參考資料：醫(yī)業(yè)觀察、國(guó)家藥監(jiān)局官網(wǎng)通告、生物通、眾測(cè)官網(wǎng)等，如果侵權(quán)及錯(cuò)誤紕漏，歡迎隨時(shí)留言批評(píng)指正。

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